流式细胞术可以检测细胞内的pH,该法利用pH敏感的荧光染料SNARF-AM,该染料带有AM(乙羧甲酯),是细胞膜通透性荧光染料,可以直接标记样品细胞。SNARF-AM可以自由通过细胞膜进入细胞内,然后被细胞内的酯酶水解去除AM,成为SNARF。SNARF-AM标记的终浓度为10µmol/L,37℃标记20min。SNARF荧光染料是单激发双发射型染料,由488nm激光器激发,可以产生两种不同波长的荧光信号,一种为640nm左右,一种为575nm左右。所以,流式检测时分别有两个通道[PE通道(FL2)和PE-TxRed通道(FL3)]能够同时检测到SNARF发射的荧光信号,FL2接收到的荧光信号的强度与FL3接收到的荧光信号的强度比值与细胞内的pH呈一定的比例关系,检测到的比值越高,说明细胞内的pH越大,比值越低,pH越小。所以,比较比值的大小就可以判断不同样品细胞间或者同一个样品细胞内不同细胞亚群之间的细胞内pH的高低。
服务报价: 100元/样
实验内容: 流式检测
服务期限: 1周
提交结果: 实验报告
客户提供材料: 细胞,试剂盒