溃疡性结肠炎（UC）是一种病因尚未完全明确的慢性非特异性炎症性肠病，主要累及结肠黏膜及黏膜下层，多从直肠开始逐渐向近端蔓延，呈连续性分布。临床典型表现为反复发作的腹痛、腹泻、黏液脓血便，常伴里急后重，病情迁延易复发，严重时可导致贫血、营养不良、肠穿孔等并发症，显著影响患者生活质量。其发病与遗传、免疫紊乱、肠道菌群失调及环境因素密切相关，免疫介导的肠道黏膜屏障损伤是核心病理机制 —— 肠道免疫细胞异常激活后释放大量炎症因子，破坏黏膜完整性，引发持续炎症反应。诊断需结合临床症状、内镜检查（可见黏膜充血水肿、糜烂溃疡）、病理活检（隐窝炎、隐窝脓肿等特征性改变）及实验室检查，治疗以抗炎、调节免疫为主，需长期管理。
一、实验背景及动物选择
在炎症性肠病基础研究领域，溃疡性结肠炎（Ulcerative Colitis, UC）动物模型是解析疾病发病机制、开展药物筛选及疗效评价的核心支撑工具。其中，2,4,6-三硝基苯磺酸（Trinitrobenzenesulfonic Acid, TNBS）诱导模型因能稳定复现人类UC的关键病理特征，且操作流程标准化程度较高，已成为国内外实验室开展相关研究的首选模型之一。其中，TNBS（三硝基苯磺酸）诱导模型因能模拟人类UC的关键病理特征，且操作流程相对标准化，成为许多实验室的首选。
动物选择：
SPF级雄性SD大鼠（体重180-200g）
选型依据：
1.SD大鼠作为常用近交系实验动物，其结肠解剖生理结构与人类结肠具有较高同源性，且体型适中，便于灌肠等侵入性操作的标准化实施；
2.选用雄性个体可排除性别激素对炎症反应的干扰，提升实验结果的重复性与可靠性。
TNBS诱导的核心原理，在于“半抗原致敏效应”：TNBS作为小分子化学试剂，需借助50%乙醇的黏膜损伤作用，才能更好地与结肠黏膜蛋白结合形成复合物，激活机体细胞免疫应答，最终引发结肠黏膜充血、水肿、溃疡等典型UC病理表现。这种“免疫介导+黏膜损伤”的机制，与人类UC的发病特点高度契合，这也是该模型广泛应用的核心原因。
二、模型构建：操作流程与技术要点
造模成功取决于细节把控，我们将实验流程拆解为“术前准备-核心操作-术后护理”三阶段。
1. 术前准备：实验体系的标准化搭建
动物预处理：大鼠造模前禁食24小时（清空肠道，保障TNBS黏膜接触效率）；
器材准备：灌肠导管、注射器、灌肠液（TNBS 50mg/kg配50%乙醇，0.25-0.5ml/只）、麻醉剂及凡士林（减少肠道损伤）。
2. 核心操作：灌肠给药的标准化实施
灌肠给药：大鼠麻醉后仰卧固定，尾部朝向操作者；导管前端涂凡士林后，缓慢插入肛门8cm（直达目标结肠区），避免戳伤黏膜引发非特异性炎症。
给药需“慢推注+防反流”：缓慢推注TNBS乙醇溶液（避免肠道痉挛），推注后保留10秒，注入生理盐水冲洗导管，拔管后轻压肛门防反流。肠道黏膜完整性直接影响造模成功率。
▲出血及软便
3. 术后护理：实验动物管理与数据监测
造模24小时后启动每日监测：观察精神状态、毛发、饮食、粪便性状（稀便/血便）及体重变化，记录并拍照。出现脱水等情况需及时干预，保障动物福利并降低实验误差。
三、模型评价：多维度标准化评价体系
1.大鼠处死后肉眼观察结肠：
正常黏膜光滑粉红；造模成功可见黏膜溃疡、弥漫性充血水肿，严重时肠壁增厚，可快速筛选无效模型。
2. 评价指标：
宏观指标：结肠长度、溃疡指数、肠壁增厚程度。
微观指标：结肠组织HE染色（黏膜坏死、炎症细胞浸润）、MPO（髓过氧化物酶）活性检测。
免疫指标：Th1/Th2细胞因子（如IFN-γ、IL-4）或Th17/Treg平衡分析。
