腹腔注射(Intraperitoneal Injection, IP)是小鼠实验中常见的给药方式,适用于药物、细胞悬液或试剂递送。然而,操作不当可能导致注射失败、组织损伤甚至小鼠死亡。本文瀚江生物将详细介绍小鼠腹腔注射的实验要点,帮助大家规范操作,提高实验成功率~
一、为什么选择腹腔注射?
吸收快:腹腔内血管丰富,药物可快速吸收进入血液循环。
操作简便:相比静脉注射(IV)或尾静脉注射,IP技术要求较低。
适用性广:适合大体积(5-10 mL/kg)或刺激性较小的药物。
局限性: 不适合强酸、强碱或高渗溶液(可能引发腹膜炎)。 吸收速度略慢于静脉注射。
二、实验前的准备工作
1. 器材准备
注射器:1 mL 或更小(精确控制剂量)
针头:25-27G(细针减少损伤),长度约1.5 cm(避免刺入过深)
消毒用品:75%酒精棉球或碘伏
小鼠:提前适应环境,避免应激;如需空腹,可禁食4-6小时(减少胃肠内容物)
2. 药物配制 确保无菌、无颗粒(可过滤)。
注射体积:5-10 mL/kg 体重(如20 g小鼠注射0.1-0.2 mL)。 刺激性药物需调整pH或稀释,避免腹腔刺激。
三、腹腔注射操作步骤
1. 小鼠固定
手法:左手拇指和食指捏住小鼠颈背部皮肤,小指或无名指固定尾部,使其腹部朝上,头部略向下倾斜(使肠道自然上移,减少刺伤风险)。
注意:若小鼠挣扎剧烈,可用布巾包裹或短暂麻醉(如异氟烷)。
2. 注射定位
最佳进针区域:小鼠下腹部 左下或右下1/3处(避开中线血管和膀胱)。
❌ 避免中线(易刺伤血管或膀胱)。
❌ 避免右上腹(靠近肝脏)。
3. 注射操作
消毒:酒精棉球擦拭注射部位。
进针: 针头以 30-45°角 刺入皮肤,进入腹腔时有明显“落空感”(约3-5 mm深)。
回抽:确认无血液、尿液或肠内容物(如有,需更换位置)。
推注:缓慢注射(0.1 mL/秒),避免压力过大。
拔针:快速拔出,轻压片刻防止渗漏。
四、常见问题及解决方案
1. 药物漏出
原因:针头未完全进入腹腔或拔针过快。
解决:重新消毒,更换注射部位。
2. 注射后小鼠死亡
可能原因: 误入血管(回抽未检查)。 刺伤内脏(如肠道、肝脏)。 药物毒性或剂量错误。
3. 腹膜炎或炎症反应
预防: 确保药物无菌、无刺激性。 避免重复同一部位注射(间隔48小时以上)。
五、实验小技巧
🔹 新手练习:可先用生理盐水或染色液练习,观察注射后腹腔分布情况。
🔹 标记注射位点:避免同一小鼠短期内重复注射同一区域。
🔹 术后观察:检查小鼠是否出现疼痛(弓背、活动减少)、腹胀或异常行为。
六、伦理与规范
操作需符合动物实验伦理,减少小鼠痛苦。
如实验需多次注射,应评估小鼠状态,必要时使用镇痛措施。
总结 小鼠腹腔注射是基础但关键的实验技术,掌握正确的进针位置、角度和注射手法可大幅提高成功率。
建议新手先在麻醉小鼠或模型上练习,熟练后再进行正式实验。